凍干熒光PCR試劑之反應(yīng)管

凍干熒光PCR試劑凍干方法是將熒光PCR試劑經(jīng)過預(yù)凍，在真空狀態(tài)下進行升華，后可制備成凍干粉。凍干熒光PCR試劑時，選用的反應(yīng)管在做凍干時有許多不足之處：1.由于反應(yīng)管呈上寬下窄的錐字形，還需要借助其他工具支撐，這樣反應(yīng)管試劑與凍干機擱板的接觸面積很小，升華時傳熱會受到限制，延長了預(yù)凍和升華的時間，反應(yīng)管中的凍干程序一般在24～30小時，凍干制品日產(chǎn)量很低。2.反應(yīng)管中的凍干，在加入凍干混合試劑后，需要進行離心處理，排出氣泡，并將粘附在反應(yīng)管壁上的試劑離心下來。3.反應(yīng)管中的凍干，在凍干結(jié)束后需要關(guān)蓋，或者是開模具做帶豁口的反應(yīng)管（排蓋）或者是凍干結(jié)束后自動壓蓋，凍干結(jié)束后將反應(yīng)管取出，在凍干機外部關(guān)蓋，這種方法對環(huán)境有很高的要求，需要恒溫恒濕，濕度不能超過15％。適合凍干熒光PCR的試劑凍干機Pilot10-15T應(yīng)用示例：

1.探針、底物、引物原料要求確定。

2.凍干溶液配方開發(fā)，采用正交法或響應(yīng)曲面法進行輔料篩選。

3.選擇適合的包材和模具。

4.設(shè)計凍干曲線配合輔料篩選。

5.確定配方及工藝。

6.穩(wěn)定性測試。

7.根據(jù)穩(wěn)定性測試結(jié)果修正工藝或配方。

8.整個環(huán)節(jié)注意環(huán)境、設(shè)備、人員的結(jié)合。