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熒光PCR凍干保護劑之羥乙基淀粉 2020-08-07

冷凍保護劑可分為滲透性和非滲透性兩類。滲透性冷凍保護劑可以滲透到細胞內，一般是一些小分子物質，主要包括甘油、DMSO、乙二醇、丙二醇、乙酰胺、甲醇等。非滲透性冷凍保護劑不能滲透到細胞內，一般是些大分子物質，主要包括聚乙烯吡咯烷酮（PVP）、蔗糖、聚乙二醇、葡聚糖、白蛋白以及羥乙基淀粉等。其中羥乙基淀粉是淀粉衍生物，羥乙基淀粉制備的幾種方法有水媒法制備、干法制備、溶媒法制備。羥乙基淀粉作為冷凍保護劑有什么作用呢？在紅細胞中可以防止紅細胞冷凍和溶解過程溶血，體內支鏈淀粉羥乙基化后... 查看更多
熒光PCR凍干保護劑之右旋糖苷 2020-08-06

右旋糖苷是聚合物類保護劑的其中一種，其保護劑還包括PVP,牛血清，聚乙二醇等。聚合物類保護劑的作用具有能提高生物制品混合液的玻璃化轉變溫度等。有些生物制品中會加入多種聚合物類保護劑。右旋糖苷是若干葡萄糖分子脫水的聚合產物，又叫葡聚糖。其常作為生物制品冷凍干燥的低溫保護劑來選用。按分子量的不同，分為中分子和低分子及小分子等，以中分子右旋糖苷40為例介紹下其應用。其分子量在4000左右。用作藥品凍干粉針劑的賦形劑在醫藥工業中廣泛使用。右旋糖苷40的加入使藥品形成均一蓬松的凍干塊，... 查看更多
凍干工藝及優化-蛋白 2020-08-06

冷凍干燥作為蛋白類藥物干燥常用的方法，能保持蛋白類藥物的活性，干燥后能保持原形，體積幾乎不變，凍干藥品疏松多孔，呈海綿狀，復水性好。藥品脫水*能長期保存。想要凍干藥品復水性好并且能長期保存，凍干工藝及優化很重要，例舉幾個方面如冷凍干燥過程中凍結中形成的冰晶形態和大小以及玻璃化程度不光影響干燥效率，還影響凍干藥品的質量。在凍結過程中要考慮配方、凍結速率、凍結方式以及是否退火等問題。配方中如果固體含量少于2%，藥品的性能就會不穩定，尤其在干燥過程中，藥品微粒不能粘在基質上，溢出的... 查看更多
熒光PCR凍干之Tris 2020-08-05

Tris又叫三羥甲基氨基甲烷。是一種白色結晶或粉末，溶于乙醇和水，微溶于乙酸乙酯、苯，是一種有刺激性的化學物質。其本身有很高的緩沖能力，在水中溶解度高，對很多酶呈惰性反應，它的這一特性使得Tris成為用于許多生化目的非常滿意的緩沖液。用于穩定反應體系的pH，在pH7.5-9.0之間有較強的緩沖能力。其緩沖液的低離子強度特點可用于線蟲核纖層蛋白的中間纖維的形成。其本身也是蛋白質電泳緩沖液的主要成分之一。此外還是制備表面活性劑、硫化促進劑和一些藥物的中間物。熒光PCR凍干體系優化... 查看更多
熒光PCR凍干保護劑之甘油 2020-08-03

多元醇類凍干保護劑包括甘油、甘露醇、山梨糖醇、肌醇、木糖醇、叔丁醇、側金盞花醇等，這一類凍干保護劑是比較常用較為普遍的凍干保護劑。以甘油作為凍干保護劑來介紹一下在蛋白質凍干中的作用。甘油具有良好的滲透能力，可以進入細胞內部和胞內大分子形成氫鍵以取代干燥脫除的水分，從而維持蛋白質、碳水化合物及脂肪等大分子活性物質的原有結構。此外，甘油還可以起到降低細胞脫水皺縮和緩解復水腫脹的效果。另外醇和糖類相似均具有醇和糖類羥基官能團，均能產生“優先水化作用”以及改變體系的玻璃態轉變溫度等，... 查看更多
熒光PCR凍干之二糖 2020-08-02

二糖又名雙糖,雙糖是碳水化合物的一種。它是由兩個單糖分子經縮合反應除去一個水分子而成的糖。例如乳糖由葡萄糖和半乳糖組成，蔗糖由葡萄糖和果糖組成，麥芽糖由兩個葡萄糖組成等。二糖作為常用的凍干保護劑，能夠有效增加蛋白凍干穩定性，但是用它們作保護劑得到的無定形蛋白凍干固體具有較低的Tg，對儲存過程中的高溫和高濕條件耐受較差。大分子量糖能夠增加凍干后固體的Tg，增加凍干后穩定性，但是對于低濃度蛋白活性保護作用不理想。例如蔗糖對蛋白質具有保護作用，葡聚糖在冷凍和干燥過程中不能防止蛋白質... 查看更多
熒光PCR凍干之聚合物 2020-08-02

聚合物又稱加聚物。由一種單體經聚合(加聚)反應而成的產物。分子具有重復的結構單位。包括晶態結構、非晶態結構、取向態結構以及織態結構。聚合物包括聚乙二醇、PVP、明膠、聚乙烯亞胺等。聚合物常用作為蛋白質的冷凍保護劑，通常聚合物的穩定作用取決于聚合物的多重性質,如優先從蛋白質表面析出、表面活性、使蛋白質溶液私度升高從而阻止其他小分子(如糖及多輕基化合物)的結晶、抑制冷凍過程中pH值的劇烈變化等。不同聚合度及濃度的聚合物所提供的保護作用不同,如聚合度大的PvP有著較高的玻璃化溫度,... 查看更多
熒光PCR凍干之氨基酸 2020-08-01

氨基酸是含有氨基和羧基的一類有機化合物的通稱。目前發現的天然氨基酸就有300多種，基本氨基酸也有二十個品鐘。氨基酸應用于食品行業、醫藥行業、化妝品行業等。氨基酸是常見的蛋白質保護劑之一。在冷凍過程中,低濃度的甘氨酸可通過抑制10或100mmol/L磷酸緩沖鹽結晶所致pH值的改變而阻止蛋白質藥物變性。無定型甘氨酸可阻止凍干過程中重組人生長激素的聚集;結晶型甘氨酸能升高成品的塌陷溫度,阻止因塌陷而引起的蛋白質藥物的破壞。常用的氨基酸類蛋白質保護劑有脯氨酸、谷氨酸鈉、丙氨酸、甘氨酸... 查看更多

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